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支原體核酸法的特異性驗證

更新時間:2020-07-07  |  點擊率:867

支原體核酸檢測法包括常規(guī)PCR法和qPCR法。和傳統(tǒng)方法比較,它具有:

①靈敏度高,特異性好。

②時間短,2-3小時出結(jié)果。

③操作簡單等特點。

因而在科研和生物制藥工業(yè)具有廣泛的應(yīng)用。

歐洲藥典也指出,核酸法可替代傳統(tǒng)的培養(yǎng)法和DNA染色法,但需要對檢測限、特異性和耐用性進行方法學(xué)的評估。

 

歐洲藥典根據(jù)支原體在細胞培養(yǎng)中發(fā)生的頻率,提出: 核酸法應(yīng)能至少檢測如下9種支原體,即精氨酸支原體、口腔支原體、雞敗血支原體、肺炎支原體、關(guān)節(jié)液支原體、發(fā)酵支原體、豬鼻支原體、萊氏無膽甾原體和檸檬螺原體。

 

對于特異性的驗證方面,歐洲藥典指出,應(yīng)選用不同于支原體的合適的細菌物種,其中合適的是與支原體有密切親緣關(guān)系的細菌屬,它們包括梭菌、乳酸桿菌和鏈球菌。

 

由于核酸法的特異性主要受到引物設(shè)計、探針和PCR擴增檢測時的反應(yīng)條件影響,不同檢測試劑盒的性能也會有一些不同,因此特異性的驗證是非常必要的。如果發(fā)現(xiàn)某細菌菌株與支原體有交叉反應(yīng),那么對于核酸法的陽性結(jié)果,還需要采用第二種方法進行證實。

之前小編向您介紹過德國MB公司(Minerva Biolabs)的靈敏度驗證標(biāo)準品,這次向您介紹的是德國MB公司提供的特異性驗證用標(biāo)準品。

產(chǎn)品介紹

核酸法特異性驗證用標(biāo)準品

 

1. 支原體基因組DNA標(biāo)準品

用途:用于PCR和qPCR方法對支原體物種的特異性檢查。

 

貨號

基因組DNA產(chǎn)品

51-0116

萊氏無膽甾原體基因組DNA

Acholeplasma laidlawii

51-0129

精氨酸支原體基因組DNA

Mycoplasma arginini

51-0117

發(fā)酵支原體基因組DNA

Mycoplasma fermentans

51-0195

生殖支原體基因組DNA

Mycoplasma genitalium

51-0130

豬鼻支原體基因組DNA

Mycoplasma hyorhinis

51-1746

滲透支原體基因組DNA

Mycoplasma penetrans

51-0124

關(guān)節(jié)液支原體基因組DNA

Mycoplasma synoviae

51-0162

關(guān)節(jié)炎支原體基因組DNA

Mycoplasma arthritidis

51-0115

雞毒支原體基因組DNA

Mycoplasma gallisepticum

51-0111

人型支原體基因組DNA

Mycoplasma hominis

51-0112

口腔支原體基因組DNA

Mycoplasma orale

51-0119

肺炎支原體基因組DNA

Mycoplasma pneumoniae

51-0164

檸檬螺旋原體基因組DNA

Spiroplasma citri

51-0177

解脲支原體基因組DNA

Ureaplasma urealyticum

 

 

每盒含1管支原體基因組DNA(10ng ±2ng)+

1管200μl 10mM Tris緩沖液(pH8.5)

 

2. 細菌基因組DNA 標(biāo)準品

用途:用于PCR和qPCR方法的特異性驗證。

 

貨號

基因組DNA產(chǎn)品(共64種)

2130-07288

洋蔥伯克霍爾德菌基因組DNA

Burkholderia cepacia

51-0101

嗜肺軍團菌基因組DNA

Legionella pneumophila

51-1514

嗜肺軍團菌弗雷澤亞種基因組DNA

Legionella pneumophila subsp. fraseri

51-1515

嗜肺軍團菌牧場亞種基因組DNA

Legionella pneumophila subsp. pascullei

51-1368

博茲曼氏軍團菌基因組DNA

Legionella bozemanii

51-1370

杜莫夫氏軍團菌基因組DNA

Legionella dumoffii

51-1533

約旦軍團菌基因組DNA

Legionella jordanis

51-1723

嗜酸乳桿菌基因組DNA

lactobacillus acidophilus

51-0566

肺炎鏈球菌基因組DNA

Streptococcus pneumoniae

51-0792

丙酮丁醇梭菌基因組DNA

Clostridium acetobutylicum

51-5571

百日咳桿菌基因組DNA

Bordetella pertussis

51-3415

副百日咳桿菌基因組DNA

Bordetella parapertussis

2102-04688

空腸彎曲菌基因組DNA

Campylobacter jejuni

51-1386

白色念珠菌基因組DNA

Candida albicans

2103-11226

光滑念珠菌基因組DNA

Candida glabrata

2104-11947

吉利蒙假絲酵母基因組DNA

Candida guilliermondii

2127-30007

鮑曼不動桿菌基因組DNA

Acinetobacter baumannii

2128-30187

嗜水氣單胞菌基因組DNA

Aeromonas hydrophila

2101-00819

煙曲霉基因組DNA

Aspergillus fumigatus

51-0031

蠟樣芽孢桿菌基因組DNA

Bacillus cereus

51-0010

枯草芽孢桿菌基因組DNA

Bacillus subtilis

2129-02046

蘇云金桿菌基因組DNA

Bacillus thuringiensis

2105-70624

希木龍念珠菌基因組DNA

Candida haemulonii

2125-90874

熱帶念珠菌基因組DNA

Candida tropicalis

2106-30039

弗氏檸檬酸桿菌基因組DNA

Citrobacter freundii

2107-04595

克氏檸檬酸桿菌基因組DNA

Citrobacter koseri

2108-00756

產(chǎn)氣莢膜梭菌基因組DNA

Clostridium perfringens

51-0053

產(chǎn)氣腸桿菌基因組DNA

Enterobacter aerogenes

2111-20680

鉛黃腸球菌基因組DNA

Enterococcus casseliflavus

51-0478

糞腸球菌基因組DNA

Enterococcus faecalis

2114-20160

希氏腸球菌基因組DNA

Enterococcus hirae

2115-08579

大腸桿菌0157:H7
基因組DNA

Escherichia coli 0157:H7

2131-05934

嗜熱脂肪土芽孢桿菌基因組DNA

Geobacillus stearothermophilus

2133-70603

耐藥型肺炎克雷伯菌基因組DNA

Klebsiella pneumoniae, ESBL+

51-1370

杜氏熒光桿菌基因組DNA

Fluoribacter dumoffii

2110-30054

陰溝腸桿菌陰溝亞種基因組DNA

Enterobacter cloacae subsp. cloacae

2112-30633

耐久腸球菌基因組DNA

Enterococcus durans

2113-20477

屎腸球菌基因組DNA

Enterococcus faecium

51-0083

大腸桿菌基因組DNA

Escherichia coli

2132-30104

肺炎克雷伯菌基因組DNA

Klebsiella pneumoniae

2134-30164

摩氏摩根菌基因組DNA

Morganella morganii

51-4479

奇異變形桿菌基因組DNA

Proteus mirabilis

51-0071

銅綠假單胞菌基因組DNA

Pseudomonas aeruginosa

2117-30121

粘質(zhì)沙雷氏菌基因組DNA

Serratia marcescens

2138-05570

宋內(nèi)志賀氏菌基因組DNA

Shigella sonnei

51-0231

金黃色葡萄球菌基因組DNA

Staphylococcus aureus

2118-20328

人葡萄球菌基因組DNA

Staphylococcus hominis

2120-20229

腐生性葡萄球菌基因組DNA

Staphylococcus saprophyticus

2122-20480

牛鏈球菌基因組DNA

Streptococcus bovis

2126-20523

變形鏈球菌基因組DNA

Streptococcus mutans

2139-20068

血鏈球菌基因組DNA

Streptococcus sanguinis

2140-04780

結(jié)腸炎耶爾森菌

Yersinia enterocolitica

51-3361

耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌

Methicilin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA)

51-0030

藤黃微球菌基因組DNA

Micrococcus luteus

2135-10036

腦膜炎奈瑟氏菌基因組DNA

Neisseria meningitidis

2136-13387

普通變形桿菌基因組DNA

Proteus vulgaris

51-7058

腸道沙門氏菌基因組DNA

Salmonella enterica

2137-04782

福氏志賀氏菌基因組DNA

Shigella flexneri

51-0164

檸檬螺旋原體基因組DNA

Spiroplasma citri

51-0044

表皮葡萄球菌基因組DNA

Staphylococcus epidermidis

2119-20263

溶血性葡萄球菌基因組DNA

Staphylococcus haemolyticus

2121-50170

嗜麥芽寡養(yǎng)單胞菌基因組DNA

Stenotrophomonas maltophilia

2123-06176

無乳鏈球菌基因組DNA

Streptococcus dysgalactiae

2141-08992

假結(jié)核耶爾森菌基因組DNA

Yersinia pseudotuberculosis

 

 

以上每盒細菌基因組DNA 標(biāo)準品規(guī)格為≈10 ng。

 

說明:

1. 基因組DNA來自確定的微生物物種(有NCTC編號),且傳代次數(shù)較少。

2. 基因組DNA經(jīng)吸附柱的方法抽提,并經(jīng)部分測序以驗證其物種。

3. DNA的量和質(zhì)量均采用標(biāo)準方法進行評估。

4. 每個批次標(biāo)準品廠家均提供質(zhì)控證書(COA)。

5. 基因組DNA為凍干粉,附帶的Tris緩沖液用于溶解DNA凍干粉,具體操作見質(zhì)控證書。

6. 基因組DNA標(biāo)準品均為室溫運輸,2-8℃保存。