支原體污染對細胞有很多危害。然而在支原體污染早期,細胞大多癥狀并不明顯,實驗人不易發現。污染到中后期,細胞才會有如下表現:
由于支原體污染早期不易被發現,建議實驗室定期對細胞上清做適當監控(可使用德國MB公司的Verno ®Gem OneStep試劑盒或Verno ®Gem qOneStep試劑盒,取2ul細胞上清即可判別是否有支原體污染,靈敏度很高,覆蓋的支原體物種很廣)。
那么,如何區分支原體污染與細菌、真菌、病毒的污染呢?
它們的各自表現如下:
細菌污染
細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀,根據感染細菌的不同,可有不同的外形,培養液一般會渾濁變黃,對細胞生長影響明顯,細胞大多在24小時死亡。
霉菌污染
培養液是清亮的,倒置顯微鏡下無雜質,37度孵箱培養2-3天,仍清亮,但出現絮狀雜質,鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物,可看到明顯的菌絲,細胞仍可生長,但時間長之后,細胞的活力狀態變差。
病毒污染
病毒污染不易發現。細胞和培養液無明顯變化。病毒在倒置顯微鏡下也不可見。大多病毒對細胞的生長影響不大,有的外源病毒會造成細胞變異、轉化。病毒的污染會干擾目的病毒的感染和產量。
支原體污染
支原體在倒置顯微鏡下不可見。早期污染,培養液也不渾濁。后期污染會出現培養基變色、細胞生長受抑、細胞成團、鏡下有小顆粒甚至死亡。
不知以上介紹您是否清楚了,能做好這些污染的防護,相信你培養的細胞一定越來越好!