動物細胞的培養技術自上世紀初出現以來,經歷了一個多世紀的發展,獲得了很大的進步。不僅建立了許多細胞系和培養了許多類型的原代細胞,而且開發了人工合成培養基和無血清培養基,并且出現了細胞工程,哺乳動物細胞的大規模培養獲得了工業化的應用,用于生產重組蛋白、單克隆抗體等生物藥、載體病毒、病毒性疫苗等。開發了微載體、中空纖維管和生物反應器等,并且實現了一種不同以往的培養方式——灌注培養。目前,灌注培養已成為高產率培養細胞的主要方法。
灌注培養有四個特點:
一是能及時地補充營養物質和排出代謝產物,有利于細胞的擴增,實現高密度培養;
二是提供穩定的環境,有利于細胞的持續增殖;
三是可實現梯度培養,如梯度培養箱的腔面和基底面分別用不同的培養液灌注,更接近體內環境,可用于體外三維組織工程的構建。
四是灌注培養檢測廢液中葡萄糖和乳酸濃度,進而更清楚當前細胞培養微環境情況。
灌注培養可用含血清的培養基。但無血清培養基已成為發展的趨勢。只是無血清開發成本高,應用范圍窄,尚未全部替代含血清培養基。
目前市面上的血清品牌很多,可重點關注締一生物提供的進口Ausbian精制新生牛血清。一般新生牛血清應具有如下特點:
1. 內毒素低,內毒素選取小于3Eu/ml,可以使細胞更健康。對于客戶做實驗更加順利。如果選取內毒素較高的血清,細胞一直泡在毒液里,短期內試不出結果,用不健康的細胞做實驗,對實驗結果造成嚴重影響。
2. 原裝試用,保證后續供貨為同一個批次。客戶試用好后對于購買的血清更加有把握,同一批次已經試過了,也保證了實驗更加順利。
3. 同一個批次數量多,2000瓶,可以長期不用換批次。保證了實驗更加順利的同時,節省了試用的時間和成本。
4. 多個批次可以選擇。不限一次試用,可以適應不同課題。以保障實驗順利。
5. 多個課題組,客戶在使用。相當于多個角度測試該批次血清,說明血清對于細胞實驗的支持,保證了實驗順利。
符合要求的血清可用于細胞培養。
參考文獻
唐光霞, 陳建蘇. 灌注動物細胞培養及其在組織工程中的應用進展.眼科新進展.2010,30(5):486-491
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