培養細胞為病毒的增殖提供了場所。
細胞是分離病毒最好和zui方便的基質,體外培養的細胞存在以下特點:
無抗體;不受到非特異拮抗物質的影響;對病毒的敏感性比體內細胞為高。
利用細胞培養進行病毒定性和定量,測定50%組織培養感染量(50%tissue culture infectious dose,FCID5o);
用于病毒感染及防治方面的研究:在制備減毒活疫苗和診斷用抗原時,細胞是病毒增殖的場所。
科學家指出:細胞培養技術是伴隨著病毒學的發展而發展起來的。
采用離心感染法或提取病毒核酸進行感染,細胞打孔器協助感染可擴大病毒感染的宿主范圍;
病毒感染指標易觀察,光鏡下可見細胞病變效應(cytopathic effect,cPE)、包涵體、細胞融合、血細胞吸附等現象,同時也便于用分子病毒學技術進行檢測。
(二)細胞生物學
單個細胞克隆便于對細胞生物學的基礎理論進行研究,如形態、結構、細胞器及其功能、遺傳物質、核型、變異、細胞轉化、生長周期等。
離體培養細胞便于進行環境因素、藥物等單因素及多因素影響的研究,探索作用機制。
當今細胞生物學研究的熱點
通訊和信號轉導、增殖與細胞周期的調控、生長和分化、衰老和死亡以及干細胞的應用研究和細胞工程是以培養細胞學為基礎,以細胞培養技術為手段和工具。
(三)細胞工程學
利用細胞融合及雜交技術,進行細胞工程的研究與開發。如生物反應器的開發研究,將編碼某生物活性物質的基因導入動物受精卵,從這種受精卵發育的動物組織、體液分泌物中獲得外源基因的表達產物。
(四)干細胞的培養
機體最原始細胞,具有較強的再生能力,在一定條件下可分化、增殖出各類細胞。
干細胞的數量極少,故需分離、保存并在體外大量培養,長成各種組織和器官。主要集中在造血干細胞、胚胎干細胞和神經干細胞上,已成為干細胞研究的首要課題。
(五)淋巴細胞培養技術的應用
在培養環境中,淋巴細胞受某些生長因子的刺激,出現旺盛的分裂、增殖。淋巴細胞培養的成功對反映機體免疫功能狀況起很大作用,如研究細胞標記,檢測T、B細胞數量及功能,檢測T細胞亞群(CD3、CD8、CD4.等細胞)的變化。
(六)遺傳性疾病的產前檢查
羊膜穿刺術獲得羊水中的胎兒細胞進行培養,在妊娠早期診斷胎兒是否患有先天性遺傳病。
少量胎兒脫落細胞是能分裂的,經2—4周生長,形成顯著單層上皮樣細胞,可按常規制備染色體。
檢測甲胎蛋白(alpha—fetoprotein,AFP)等,產前檢測出幾十種代謝病與遺傳病,較準確地指導優生優育。
(七)毒性實驗及生物實驗的工具
培養細胞學對化學物質、放射線、激素、藥物等提供了最簡易而又可靠的方法,并對毒性機制研究提供了良好的實驗對象。對腫瘤細胞進行抗癌藥物的藥敏測試,以指導臨床抗癌藥物的使用及配伍。
(八)在現代生物技術中應用
基因分離、基因測序與表達、基因轉移與重組、癌基因研究等。
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