牛血清是目前細胞培養中用量最大的天然培養基,含有豐富的、細胞生長必需的營養成分,具有極為重要的功能。
要保證血清質量,需要有嚴格的質控,包括從外觀到理化性質、細胞增殖試驗和微生物檢查,制定一系列的標準,以及出廠產品能符合這些標準。
一、外觀及相關物質含量
以胎牛血清為例,優質的特級胎牛血清,外觀應是淡棕色至橙色透明液體,無顆粒物沉淀。
PH在6.7-8.2之間;
滲透壓在260-340mosm/kg之間;
血紅蛋白含量小于20mg/dL;
總蛋白含量在30-50g/L;
白蛋白含量在14-34g/L;
α、β、γ球蛋白含量則以實際測量為準;
IgG應小于250μg/mL;
內毒素含量應小于3EU/mL;
內毒素直接參與細胞凋亡,血清中內毒素含量越低,對細胞毒性越小,越利于細胞的生長和傳代
二、無菌檢測
優質的特級胎牛血清還要經過嚴格的無菌檢測。確保血清無污染。
檢測項目包括厭氧菌、好氧菌、真菌(最容易污染細胞的酵母菌和霉菌都應包括在內)以及支原體檢測。檢測結果應全部為陰性,視為通過無菌檢測。
三、病毒檢測
血清含有bing毒,會導致宿主細胞發生腫脹、壞死、脫壁,不僅嚴重影響實驗進度,更可能會對實驗人員造成威脅。
對于血清中的病毒檢測,重點放在那些曾世界大范圍爆發、人畜共患或是十分常見的病毒身上。
每個地區的法規會有些許區別,但牛副流感3型病毒(PI-3)、牛腹瀉病毒(BVD)、牛細小病毒等是任何國家和地區的檢測報告中,都應標注清楚的。
一批合格的血清,所有bing毒檢測項目均應為陰性。
四、細胞生長情況
促進細胞增殖方面,也是血清一項不可忽視的指標。每一批次血清也應就克隆率、細胞毒性、細胞增殖密度、和倍增時間進行檢查。
所有檢測結果應符合相應的規范。
五、抗體檢測
病毒檢測反映的是動物采血時、或血清加工過程中有沒有感染病毒,而抗體檢測則表示該供體動物在采血前一段時間內,是否感染過病毒。
優質的特級胎牛血清,應保證動物從始至終都沒有感染過相關病毒,因此檢測結果應為陰性。
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