細胞污染支原體,是令細胞培養相關從業者十分頭疼的問題。細胞感染了支原體又不愿丟棄怎么辦?本系列內容分情況為大家解答。
01
普通細胞支原體祛除
適用范圍
對于費力擴增的細胞(如已轉染,或經過體外刺激),如果細胞中發現有支原體污染,但此細胞又不愿丟棄,希望繼續培養,推薦使用MB公司生產的復合抗生素Zell Shield®。
02
Zell Shield®特點
·特點
高效廣譜:Zell Shield®通過阻止支原體、真菌、霉菌、致命病菌增殖過程中DNA及蛋白的合成,有效抑制上述微生物的增殖。
安全:無細胞毒性,采用復合支原體敏感抗生素,對大多數細胞株無毒。
活性穩定:在細胞培養期間,Zell Shield®始終保持穩定的活性。
使用方便:Zell Shield®為無菌溶液,可直接加入培養基使用。
03
Zell Shield®使用方法
使用方法
(1)在每次使用Zell Shield®之前,細胞傳代時,先使用廠家推薦的“懸浮沖洗法”處理好細胞,再使用加了Zell Shield®的培養基養細胞,能達到*佳的祛除支原體的效果。
(2)Zell Shield®常規為-18℃保存,建議使用前,先融化分裝,仍舊-18℃避光保存,使用時按需融化配置。避免反復凍融。
(3)Zell Shield®按1:100濃度可直接加入培養基。例如:500ml培養基中添加5ml Zell Shield®,50mL/瓶的Zell Shield®可供5L培養基使用。
什么是懸浮沖洗法
據研究表明,約98%的支原體存在于細胞表面和細胞間隙。細胞傳代時,用干凈的PBS反復懸浮沖洗,就能把70%以上的支原體沖下來。
支原體直徑在180~350nm之間,遠遠小于細胞直徑。通過低速離心,很容易將細胞和支原體分離,棄上清即可祛除大部分支原體。
簡要步驟
消化細胞
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離心
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棄上清
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PBS清洗細胞
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低速離心棄上清
重復清洗3次
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加入含有Zell Shield®的