胎牛血清是一種性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應取自剖腹產的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。
顯然,胎牛血清是品質非常高的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分最少。
胎牛血清在細胞培養中的作用:
1.提供對維持細胞指數生長的激素,基礎培養基中沒有或量很少的營養物,以及主要的低分子營養物。
2.提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結合或調節它們所結合的物質活力。
3.有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到解毒作用。
4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子來源。
5.起酸堿度緩沖液作用。
6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。
7.參與細胞凍存。
在細胞培養中,胎牛血清加入基礎培養基的濃度大多為5%~20%(最常見為10%)的。具體到不同試驗,應依據文獻報導,或細胞類型或基礎培養基的成分來確定最佳濃度。 胎牛血清應在-20℃儲存,運輸應干冰冷鏈運輸,避免反復凍融,確保血清中因子活性不受影響,保證血清優良品質。
我們的建議是盡量選擇同一批次的血清。對于血清中某些指標,比如蛋白含量等,有特殊要求,可告知我們,會盡可能挑選符合需求的批次。
同一批次間不同瓶血清的差異,肯定是要小于不同批次的。
不同飼養條件下、不同品種,統一的流水線上操作的不同員工,都會導致同一品牌不同批次的血清略有差別。不同批號的血清在同一個實驗中混用,很難保證細胞不會因為「飲食」改變而耍耍實驗數據不穩定這樣的「小脾氣」。
就比如,下圖是某批次血清成分檢測情況,其中各類免疫球蛋白的含量會根據不同批次而發生變化,如果實驗中對于血清中這類蛋白含量有要求的話,就要注意盡量買同一批次的血清。