許多解決重大疾病的研究,都是以細胞生物學為基礎的。而細胞生物學研究的重要手段之一,就是細胞體外培養技術。可以這樣說,沒有細胞培養技術,就沒有如今的細胞生物學。
細胞培養指在人工創造的與體內環境相似的體外條件下,比如適宜的溫度、pH,以及一定的營養成分,使細胞生長、繁殖并維持主要結構和功能的一種技術。不同細胞在進行體外培養時,在操作上會有些許不同,需要根據細胞類型與實驗目的,摸索合適的培養條件。
但原則上講,需要注意以下幾個關鍵點:
一、嚴格的無菌環境
實驗環境的污染是細胞培養的大忌。細菌、真菌、支原體等微生物的污染,都會造成細胞出現凋亡、裂解等狀況,進而影響實驗結果。因此,要定期對實驗環境進行清潔消毒。可以用消毒液體對實驗室的墻壁、地面以及桌椅板凳進行噴灑和擦拭,一定時長的紫外線照射,都有不錯的效果。
選擇污染清除試劑,如德國MB公司的Mycoplasma-off,對實驗臺面實驗儀器等進行噴灑和擦拭,有效預防各類污染。
對于培養箱水槽、恒溫水浴鍋,這類衛生死角,可定期更換無菌水,并在水中添加德國MB公司的Water Shield,也能起到預防作用。
二、選擇優質的培養試劑
細胞用的培養試劑多選用分析級別的試劑。其中,胎牛血清的選擇很重要。劣質的胎牛血清不但有污染細胞的風險,而且還會因為營養成分的缺乏,改變細胞狀態,影響實驗結果。
優質的胎牛血清,采自5-8月齡牛胚胎,富含各類細胞生長繁殖所需的營養成分,在出廠前均應通過質量檢測,出具《檢測報告》。
締一生物的Ausbian進口胎牛血清,選擇內毒素更低的批次,內毒素≤3EU/ml,降低內毒素對細胞的影響,運輸全程冷鏈,避免反復凍融,每批次附有檢測報告。
三、正確的實驗操作
在進行細胞實驗時,要嚴格按照操作流程進行實驗。注意實驗儀器的規范用法與無菌操作,避免因實驗操作而帶來的額外污染。